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培养基中加双抗作用是什么(培养基加双抗的作用)

培养基加双抗的作用以gibco的青霉素链霉素溶液(100x)为例(货号:15140163),含10000IU/ml青霉素,10000ug/ml链霉素,即工作浓度(1x)青霉素、链霉素用量分别为100IU/ml和100ug/ml 培养基里加双抗刚热完培养基不可以加链霉素,需要冷却才可以添加链霉素因为不冷却的情况下添加链霉素,容易使链霉素失效。链霉素的主要抗革兰氏阴性菌,常与青霉素一起用于细胞培养,防止微生物污染。 培养基双抗怎么加培养液:用含10%胎牛血清的DMEM培养基,PH值7.2-7.4,新鲜配制的不用加谷氨酰胺,超过2周后加入1ML/100ML培养基。如果长得不好,可以提高胎牛血清的浓度到20%左右,培养瓶最好用添加EGF的明胶或胶原裱衬,浓度一般是1-3mg/ml,不用也行,有的人也添加VEGF,浓度一般是10-50ng/ml,常规加碳酸氢钠和双抗。在37℃、体积分数5%CO2的条件下培养.细胞贴壁生长,胰酶每2~4d传代1次.也有用M199培养基的.其他一样.(仅供参考)培养基双抗是哪两个VP试验由Voges和Proskauer两位学者创建,故有此学名。它是微生物检验中常用的生化反应之一。其原理为:某些细菌能分解葡萄糖产生丙酮酸,并进一步将丙酮酸脱羧成为乙酰甲基甲醇,后面在碱性环境下被空气中的氧氧化成为二乙酰,进而与培养基中的精氨酸等所含的胍基结合,形成红色的化合物,即VP试验阳性。培养基中加双抗的比例1.提前一天将分装好的FBS从—20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化冻;2.在细胞间中将FBS以及其它需要添加的成分(如,丙酮酸钠、抗生素等),按照比例加入DMEM培养基中,作好标签;放入4℃冰箱保存。配制比例如下:DMEM(High glucose)/ DMEM培养基(高糖)谷氨酰胺50ul非必需氨基酸500ul丙酮酸钠500ulB-巯基乙醇双抗50ul血清7.5mlLIF5ul二、ES细胞培养基DMEM+15%FBS2-巯基乙醇5.5uM1000XL-谷氨酰胺2mM100XLIF1000U/mL10000X非必需氨基酸100uM100X双抗100X

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