elisa包被原理ELISA试剂盒分为竞争法和夹心法，竞争法一般用于检测无法同时与两种抗体结合的小分子抗原，其原理为: 将针对小分子抗原的抗体包被在酶标板上，检测时加入待测样本，使样本中的待测抗原与酶标板上的抗体结合。然后加入HRP酶标记的抗原，此抗原也可与酶标板上的抗体结合，由于酶标板上固著的抗体数量有限，因此当样本中抗原的量越多，则HRP酶标记抗原可结合的包被抗体就越少，两种抗原竞争结合包被抗体，所以称为竞争法。接着加入HRP酶的底物TMB，TMB被酶催化发生颜色反应，当样本中抗原量越多，代表酶标板孔内留下的HRP标记抗原越少，显色也就越浅。 夹心法又叫双抗夹心法，用于检测较大分子的抗原或抗体，又分为:双抗体夹心法，用于检抗原;和双抗原夹心法用于检抗体。elisa中包被的目的是什么无水碳酸钠63.6克及碳酸氢钠33.6克溶于蒸馏水中稀释至1000mlelisa为什么要包被如果包被缓冲液是指ELISA中的包被缓冲液的话，我认为没有影响。因为该缓冲液成分都是无机盐，高压灭菌不会对其性质带来改变，只是可能降低了微生物限度。我实验室的包被缓冲液不高压灭菌，用0.22的膜过滤后装瓶，冷藏保存，有效期2周。 elisa蛋白包被原理斑点ELISA，是ELISA中的一种检测方法。ELISA是酶联免疫吸附法的缩写，主要是将蛋白结合到某种载体上，捕获液体中的某种物质。DOT-ELISA一般的载体是采用NC膜（硝酸纤维素膜），由于DOT-ELISA的检测结果是通过检测显示出来的斑点进行判断结果的，所以叫做DOT-ELISA（斑点ELISA).希望我的回答对您有一些帮助elisa的原理BSA试剂盒利用双抗夹心法原理，基于BSA标准品，定量检测样品中BSA的含量，颜色强度与BSA含量呈正比。艾美捷 E4329-100BSA试剂盒特点：比色法检测，无放射性检测范围：468 – 30000 ng/ml灵敏度：216 ng/ml样品类型：血清，血浆，组织裂解液，细胞裂解液，细胞培养上清，以及其它生物液体。elisa包被的作用方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。方法二　用于检测未知抗体的间接法：用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。ELISA包被　(二)　操作步骤　　方法一　用于检测未知抗原的双抗体夹心法:　　1.　包被：用0.05M PH9.?碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。　　2.　加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。　　3.　加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。　　4.　加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。　　5.　终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。　　6.　结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。elisa包被后怎么封闭包被板上的成分有很强的阴离子吸附功能，包被液的PH为9.6，可以使被包被的蛋白质为碱性，因此可以牢固吸附在包被孔中自己包被elisa需要，第一步即用包被液稀释抗原，4°C包被过夜。包被液为碳酸盐缓冲液：碳酸氢钠 2.93g；碳酸钠1.59g 配成水溶液1L，PH=9.6；4°C保存。