试管和三角瓶的包扎PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值 自然PDA培养基的配制称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。加热溶解 把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。分装 按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。加棉塞 培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。包扎 加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。棉塞制作说明棉塞的作用:一是防止杂菌污染;二是可过滤空气,保证通气良好,并可减缓培养基水分的蒸发,所以正确地制备棉塞是培养基制备中重要的一环。正确的棉塞是形状、大小,松紧应与试管口(或三角烧瓶)完全适合。过紧则妨碍空气流通,操作不便;过松时,空气会毫无障碍地进入试管(或三角烧瓶)中,达不到灭菌的目的。棉塞过小往往易掉进试管内,因此棉塞质量的优劣对实训的结果有很大的影响。正确的棉塞头较大,加塞时,应使棉塞长度的1/3留在试管口外,2/3在试管口内。目前,有条件的实训室已使用坚固的塑料试管帽、金属试管帽、硅胶泡沫塞替代棉塞,制作棉塞要选纤维较长的棉花,一般不选用脱脂棉。因为它容易吸水变湿,造成污染,而且价格也贵。试管的包扎方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,按培养基成分划分属于半合成培养基。PDA是一种培养真菌的通用培养基,是对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。其做法是先洗净去皮,再称取200g马铃薯切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用八层纱布过滤,加热,再据实际实验需要加15-20g琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂溶解完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(115℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者摇匀,冷却后贮存备用。培养皿和试管的包扎洗干净后干燥,不然容易破,一般十个一叠用牛皮纸或报纸包好,有手法的,一边卷一边折试管和三角瓶上棉花塞的作用高锰酸钾制氧气在试管口要塞棉花的作用是防止高锰酸钾粉末进入导管,高锰酸钾重量轻为防止产生气体时吹出的粉尘混入氧气中,干扰对氧气性状的观察试管口要塞棉花。高锰酸钾制取氧气的文字表达式为:高锰酸钾→(加热)锰酸钾+二氧化锰+氧气。包扎移液管、试管和三角瓶时,要注意哪些问题试管或三角瓶棉塞的制作步骤 1.取棉花 按试管或三角瓶口径大小,取适量市售棉花(不可用脱脂棉),使成形后棉塞大小适合试管或三角瓶口径及棉塞在口内的长度。 整理 将棉絮铺成近方形或圆形片状(若制成试管棉塞,则其直径5—6 cm),中间较厚,边缘薄而纤维外露三角瓶包扎图解三角手挂。这种方法用于固定手掌或者手指放在较高的位置。具体操作是托起伤者伤侧的手臂,用三角巾覆盖在受伤手臂的前端,然后包裹住前端及肘部,绕到颈部后打结即可。大手挂。这种方法要让伤者坐下,然后将三角巾的一端底角从前臂与胸之间穿过,将上端拉到没有受伤一侧的颈部,再从颈后绕到受伤一侧的颈前,将三角巾的下端底角拉起覆盖前臂,最后打结即可。试管和三角瓶包扎时塞棉花塞的目的将母液从冰箱中取出,依次排好,按需要定量吸取,放入量筒中。称取琼脂,加少量水后加热,并不断搅拌,直到全部溶化。再加入称好的糖和前面备好的各种成分,不断搅拌,使之充分混合。测定已配好的培养基氢离子浓度(酸碱度),用0.1~1.0摩尔/升(0.1~1.0摩)氢氧化钠和盐酸将培养基调至所需的浓度。将配好的培养基分别灌注到培养瓶中(试管或三角瓶),用盖子(棉塞、橡胶塞、铝箔)将瓶盖好,外面再包一层牛皮纸,标明编号试管和锥形瓶的包扎主要有:玻璃塞、橡胶塞、软木塞在一般情况下为什么试管或者三角瓶塞子从质材上主要有:玻璃塞、橡胶塞、软木塞试管和三角瓶,如果用于存储或短时间放置试剂一般用橡胶塞或软木塞 ; 如果用于实验装置会用带孔的橡胶塞或软木塞,可以在塞孔装上玻璃导管。塞子从质材上主要有:玻璃塞、橡胶塞、软木塞试管和三角瓶,如果用于存储或短时间放置试剂一般用橡胶塞或软木塞 ; 如果用于实验装置会用带孔的橡胶塞或软木塞,可以在塞孔装上玻璃导管。如何包扎试管和三角瓶马铃薯 200克 葡萄糖 20克琼脂 15~20克 自来水 1000毫升自然PH 1.培养基经灭菌后,必须放在37C温箱培养24h,无菌生长者方可使用。2.PDA培养基一般不需要调pH。对于要调节pH的培养基,一般用pH试纸测定其pH。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节。调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基,用于菌类的震荡培养。4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素,加入量为0.2g/L培养基,主要是为了抑制细菌的生长,减少干扰性 (1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20-30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。滤液补充水分到1000ml。(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝。(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。试管灭菌包扎塞口是为了防止染菌,灭菌是把已经存在的菌杀死,然后塞上棉塞防止灭菌后染菌,这样才能保证只有你想要的菌,而没有其他的杂菌.所有在实验操作中要用的器械都要事先灭菌.空气中飘浮着许多微生物,即使是在经过严格消毒的微生物实验室内也不能保证绝对无菌。在用于微生物实验的三角瓶或试管口塞上棉塞,就是为了防止外界微生物进入三角瓶或试管,保持三角瓶或试管内部无菌状态或微生物的纯培养状态。
